藥物分析--紫外分光光度法
發(fā)布時(shí)間:2018/7/18 11:17:09 關(guān)注量:1410
藥物分析是分析化學(xué)的一個(gè)重要應(yīng)用領(lǐng)域,在藥物分析工作中經(jīng)常出現(xiàn)含復(fù)雜成分的藥物或復(fù)方藥物,對(duì)此經(jīng)典的容量分析,重量分析等化學(xué)分析方法往往難于處理,一般都要借助于儀器分析方法,我國(guó)在藥物分析方法上的研究經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展已經(jīng)有了很大的進(jìn)步,用于藥品質(zhì)量控制的分析方法日益增多,使用的儀器類型日趨先進(jìn),并且儀器分析所占的比率越來(lái)越大,常用的儀器分析方法有紫外 紅外分光光度法?氣相色譜法?液相色譜法?毛細(xì)管電泳?質(zhì)譜法?熱分析法等,這些方法都有各自的特點(diǎn)和應(yīng)用范圍,紫外分光光度法由于具有方法簡(jiǎn)便?靈敏度和精確度高?重現(xiàn)性好?可測(cè)范圍廣等明顯優(yōu)點(diǎn),加之其儀器價(jià)格相對(duì)低廉易于維護(hù)因而越來(lái)越為分析工作者所重視,發(fā)展成為儀器分析方法中應(yīng)用最廣泛的方法以我國(guó)歷版藥典為例,紫外分光光度法的應(yīng)用在其中占據(jù)很大的比例,高居各種儀器分析方法之首。雖然不斷有新的分析方法出現(xiàn),但紫外分光光度法因?yàn)榫哂徐`敏度高?快速?準(zhǔn)確等特點(diǎn)一直是制劑含量測(cè)定的首選方法,紫外分光光度法可廣泛應(yīng)用于分析合成藥物,生物藥品以及中藥制劑等各種藥物。
對(duì)紫外分光光度法,在飛速發(fā)展的現(xiàn)代藥物分析領(lǐng)域中的可靠性和作用作了總結(jié), 以大量的文獻(xiàn)和數(shù)據(jù)說(shuō)明紫外分光光度法仍然是有效可行的一種藥物分析方法,紫外分光光度法發(fā)展到今天已經(jīng)成為一種非常成熟的方法,衍生出許多種具體的應(yīng)用方法如:雙波長(zhǎng)和三波長(zhǎng)分光光度法、差示分光光度法、導(dǎo)數(shù)分光光度法、薄層掃描紫外光譜法、光聲光譜法、熱透鏡光譜分析法、催化動(dòng)力學(xué)分光光度法、速差動(dòng)力學(xué)分光光度法、流動(dòng)注射分光光度法以及化學(xué)計(jì)量學(xué)輔助的紫外分光光度法等等。
這些方法大都可用于藥物分析的含量測(cè)定之中。
雙波長(zhǎng) 三波長(zhǎng)分光光度法
普通的單波長(zhǎng)分光光度法要求試樣透明無(wú)渾濁,對(duì)于吸收峰相互重疊的組分,或背景很深的試樣分析往往難以得到準(zhǔn)確的結(jié)果,雙波長(zhǎng)分光光度法簡(jiǎn)稱雙波長(zhǎng)法,是在傳統(tǒng)的單波長(zhǎng)分光光度法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。使用二個(gè)單色器得到二個(gè)不同波長(zhǎng)的單色光,它取消了參比池,通過(guò)波長(zhǎng)組合在一定程度上能消除渾濁背景和重疊譜圖的干擾,雙波長(zhǎng)法一般要求有二個(gè)等吸光度點(diǎn),而三波長(zhǎng)法,則只需在吸收曲線上任意選擇三個(gè)波長(zhǎng)1 2 3處測(cè)量吸光度,由這三個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度 A1A2A3計(jì)算 A A 與待測(cè)物濃度成正,因而可通過(guò) A-C 曲線求出待測(cè)組分的含量,與雙波長(zhǎng)法相比較,三波長(zhǎng)法更能有效地消除散射干擾物的影響,因而更適合于渾濁樣品分析。此外,對(duì)吸收干擾物,如果在吸收光譜上找不到合適的等吸光度點(diǎn),用一般分光光度計(jì)就難于進(jìn)行雙波長(zhǎng)測(cè)定,而用三波長(zhǎng)法則可順利完成測(cè)定。在實(shí)際工作中,這兩種方法在波長(zhǎng)選擇和計(jì)算方面比單波長(zhǎng)法麻煩,但測(cè)定的準(zhǔn)確度,精確度更高,隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的普及發(fā)展,現(xiàn)在的分光光度計(jì)一般都由計(jì)算機(jī)控制,還設(shè)計(jì)出專用的程序?qū)悠啡芤褐写郎y(cè)組分自動(dòng)測(cè)定并進(jìn)行結(jié)果計(jì)算。
差示分光光度法
差示分光光度法是一種調(diào)節(jié)分光光度計(jì)的 0%T 和 100%T 以進(jìn)行光度測(cè)量的方法,差示測(cè)量的主要目的在于提高分光光度測(cè)量的精確度,準(zhǔn)確度和靈敏度,該法通過(guò)改變調(diào)節(jié)儀器滿刻度和零點(diǎn)的條件使普通光度法中較小的標(biāo)尺讀數(shù)間隔擴(kuò)展為較大的間隔,從而提高了測(cè)量的精密度,常用的差示測(cè)量法有四種類型
1. 高吸光度差示法?適用于分析高濃度組分?特別適合于待測(cè)組分吸光度大于 1 的情形?參比液的透光率愈接近待測(cè)組分的透光率?測(cè)量的相對(duì)濃度誤差也愈小。
2. 低吸光度差示法,該法與高吸光度差示法相反一般只適用于待測(cè)組分吸光度低于 0.1 時(shí)的情況。
3. 最精密差示測(cè)量法,該法是前兩者相結(jié)合而成,采用兩個(gè)參比標(biāo)準(zhǔn)溶液調(diào)節(jié)讀數(shù)標(biāo)尺,從理論角度來(lái)看,這是一種較理想的測(cè)量方法但在實(shí)際工作中受儀器功能限制,且由于差示吸光度和濃度不成線性關(guān)系導(dǎo)致分析誤差增大,它的應(yīng)用不多見(jiàn)。
4.全差示光度測(cè)量法,該法可全標(biāo)尺放大,收到最精密差示測(cè)量法的效果,同時(shí)又克服了最精密差示測(cè)量法的缺點(diǎn),與常規(guī)分光光度計(jì)相比全差示光度計(jì)的靈敏度?準(zhǔn)確度?測(cè)量精度都有顯著提高,儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單?性能穩(wěn)定?操作方便?擴(kuò)展了光度分析的應(yīng)用范圍?可用于高?中 低 微量組分的差示分光光度分析
導(dǎo)數(shù)分光光度法
導(dǎo)數(shù)分光光度法是應(yīng)用最為廣泛的紫外分光光度法之一,60多年前Dymond首先提出把導(dǎo)數(shù)技術(shù)應(yīng)用于儀器分析領(lǐng)域,50年代初導(dǎo)數(shù)技術(shù)開(kāi)始引入紫外可見(jiàn)和紅外分光光度分析中?為分光光度法的發(fā)展開(kāi)辟了一條新的途徑。此后,人們開(kāi)展了對(duì)導(dǎo)數(shù)分光光度法的理論,實(shí)驗(yàn)技術(shù)和測(cè)量裝置的研究,但是直到60年代,由于儀器的限制,導(dǎo)數(shù)技術(shù)的發(fā)展仍然較緩慢,70 年代以來(lái),隨著低噪音運(yùn)算放大器的出現(xiàn)和微型計(jì)算機(jī)在分光光度計(jì)中的應(yīng)用,簡(jiǎn)化了獲得導(dǎo)數(shù)光譜的方法,有力地推動(dòng)了導(dǎo)數(shù)光譜的理論和應(yīng)用研究的發(fā)展,在分光光度分析中引入導(dǎo)數(shù)技術(shù),擴(kuò)展了分光光度法的應(yīng)用范圍,在多組分同時(shí)測(cè)定,渾濁樣品分析,消除背景干擾和加強(qiáng)光譜的精細(xì)結(jié)構(gòu)以及復(fù)雜光譜的辨析等方面,導(dǎo)數(shù)分光光度法在一定程度上解決了普通分光光度法難以解決的問(wèn)題,吸光度比值導(dǎo)數(shù)分光光度法是在導(dǎo)數(shù)分光光度法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的分光光度技術(shù)?由F.Salinas等人于 1990 年提出,最先是用于解決水楊酸和水楊酸甘氨酸混合物的。?定量分析,吸收度比值導(dǎo)數(shù)分光光度法很方便的將重疊吸收帶分開(kāi)而消除干擾。與普通導(dǎo)數(shù)光譜法比較,具有分辨率更高?更靈敏?計(jì)算簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn),具有一定的發(fā)展前景。
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