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藥物分析--紫外分光光度法

發(fā)布時(shí)間:2018/7/18 11:17:09    關(guān)注量:1410

藥物分析是分析化學(xué)的一個(gè)重要應(yīng)用領(lǐng)域,在藥物分析工作中經(jīng)常出現(xiàn)含復(fù)雜成分的藥物或復(fù)方藥物,對(duì)此經(jīng)典的容量分析,重量分析等化學(xué)分析方法往往難于處理,一般都要借助于儀器分析方法,我國(guó)在藥物分析方法上的研究經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展已經(jīng)有了很大的進(jìn)步,用于藥品質(zhì)量控制的分析方法日益增多,使用的儀器類型日趨先進(jìn),并且儀器分析所占的比率越來(lái)越大,常用的儀器分析方法有紫外 紅外分光光度法?氣相色譜法?液相色譜法?毛細(xì)管電泳?質(zhì)譜法?熱分析法等,這些方法都有各自的特點(diǎn)和應(yīng)用范圍,紫外分光光度法由于具有方法簡(jiǎn)便?靈敏度和精確度高?重現(xiàn)性好?可測(cè)范圍廣等明顯優(yōu)點(diǎn),加之其儀器價(jià)格相對(duì)低廉易于維護(hù)因而越來(lái)越為分析工作者所重視,發(fā)展成為儀器分析方法中應(yīng)用最廣泛的方法以我國(guó)歷版藥典為例,紫外分光光度法的應(yīng)用在其中占據(jù)很大的比例,高居各種儀器分析方法之首。雖然不斷有新的分析方法出現(xiàn),但紫外分光光度法因?yàn)榫哂徐`敏度高?快速?準(zhǔn)確等特點(diǎn)一直是制劑含量測(cè)定的首選方法,紫外分光光度法可廣泛應(yīng)用于分析合成藥物,生物藥品以及中藥制劑等各種藥物。

對(duì)紫外分光光度法,在飛速發(fā)展的現(xiàn)代藥物分析領(lǐng)域中的可靠性和作用作了總結(jié), 以大量的文獻(xiàn)和數(shù)據(jù)說(shuō)明紫外分光光度法仍然是有效可行的一種藥物分析方法,紫外分光光度法發(fā)展到今天已經(jīng)成為一種非常成熟的方法,衍生出許多種具體的應(yīng)用方法如:雙波長(zhǎng)和三波長(zhǎng)分光光度法、差示分光光度法、導(dǎo)數(shù)分光光度法、薄層掃描紫外光譜法、光聲光譜法、熱透鏡光譜分析法、催化動(dòng)力學(xué)分光光度法、速差動(dòng)力學(xué)分光光度法、流動(dòng)注射分光光度法以及化學(xué)計(jì)量學(xué)輔助的紫外分光光度法等等。

這些方法大都可用于藥物分析的含量測(cè)定之中。

                                                                雙波長(zhǎng) 三波長(zhǎng)分光光度法

普通的單波長(zhǎng)分光光度法要求試樣透明無(wú)渾濁,對(duì)于吸收峰相互重疊的組分,或背景很深的試樣分析往往難以得到準(zhǔn)確的結(jié)果,雙波長(zhǎng)分光光度法簡(jiǎn)稱雙波長(zhǎng)法,是在傳統(tǒng)的單波長(zhǎng)分光光度法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。使用二個(gè)單色器得到二個(gè)不同波長(zhǎng)的單色光,它取消了參比池,通過(guò)波長(zhǎng)組合在一定程度上能消除渾濁背景和重疊譜圖的干擾,雙波長(zhǎng)法一般要求有二個(gè)等吸光度點(diǎn),而三波長(zhǎng)法,則只需在吸收曲線上任意選擇三個(gè)波長(zhǎng)1 2 3處測(cè)量吸光度,由這三個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度 A1A2A3計(jì)算 A A 與待測(cè)物濃度成正,因而可通過(guò) A-C 曲線求出待測(cè)組分的含量,與雙波長(zhǎng)法相比較,三波長(zhǎng)法更能有效地消除散射干擾物的影響,因而更適合于渾濁樣品分析。此外,對(duì)吸收干擾物,如果在吸收光譜上找不到合適的等吸光度點(diǎn),用一般分光光度計(jì)就難于進(jìn)行雙波長(zhǎng)測(cè)定,而用三波長(zhǎng)法則可順利完成測(cè)定。在實(shí)際工作中,這兩種方法在波長(zhǎng)選擇和計(jì)算方面比單波長(zhǎng)法麻煩,但測(cè)定的準(zhǔn)確度,精確度更高,隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的普及發(fā)展,現(xiàn)在的分光光度計(jì)一般都由計(jì)算機(jī)控制,還設(shè)計(jì)出專用的程序?qū)悠啡芤褐写郎y(cè)組分自動(dòng)測(cè)定并進(jìn)行結(jié)果計(jì)算。 

                                                                     差示分光光度法

差示分光光度法是一種調(diào)節(jié)分光光度計(jì)的 0%T100%T 以進(jìn)行光度測(cè)量的方法,差示測(cè)量的主要目的在于提高分光光度測(cè)量的精確度,準(zhǔn)確度和靈敏度,該法通過(guò)改變調(diào)節(jié)儀器滿刻度和零點(diǎn)的條件使普通光度法中較小的標(biāo)尺讀數(shù)間隔擴(kuò)展為較大的間隔,從而提高了測(cè)量的精密度,常用的差示測(cè)量法有四種類

1. 高吸光度差示法?適用于分析高濃度組分?特別適合于待測(cè)組分吸光度大于 1 的情形?參比液的透光率愈接近待測(cè)組分的透光率?測(cè)量的相對(duì)濃度誤差也愈小。

2. 低吸光度差示法,該法與高吸光度差示法相反一般只適用于待測(cè)組分吸光度低于 0.1 時(shí)的情況。

3. 最精密差示測(cè)量法,該法是前兩者相結(jié)合而成,采用兩個(gè)參比標(biāo)準(zhǔn)溶液調(diào)節(jié)讀數(shù)標(biāo)尺,從理論角度來(lái)看,這是一種較理想的測(cè)量方法但在實(shí)際工作中受儀器功能限制,且由于差示吸光度和濃度不成線性關(guān)系導(dǎo)致分析誤差增大,它的應(yīng)用不多見(jiàn)。

4.全差示光度測(cè)量法,該法可全標(biāo)尺放大,收到最精密差示測(cè)量法的效果,同時(shí)又克服了最精密差示測(cè)量法的缺點(diǎn),與常規(guī)分光光度計(jì)相比全差示光度計(jì)的靈敏度?準(zhǔn)確度?測(cè)量精度都有顯著提高,儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單?性能穩(wěn)定?操作方便?擴(kuò)展了光度分析的應(yīng)用范圍?可用于高?中  微量組分的差示分光光度分析

                     導(dǎo)數(shù)分光光度法

導(dǎo)數(shù)分光光度法是應(yīng)用最為廣泛的紫外分光光度法之一,60多年前Dymond首先提出把導(dǎo)數(shù)技術(shù)應(yīng)用于儀器分析領(lǐng)域,50年代初導(dǎo)數(shù)技術(shù)開(kāi)始引入紫外可見(jiàn)和紅外分光光度分析中?為分光光度法的發(fā)展開(kāi)辟了一條新的途徑。此后,人們開(kāi)展了對(duì)導(dǎo)數(shù)分光光度法的理論,實(shí)驗(yàn)技術(shù)和測(cè)量裝置的研究,但是直到60年代,由于儀器的限制,導(dǎo)數(shù)技術(shù)的發(fā)展仍然較緩慢,70 年代以來(lái),隨著低噪音運(yùn)算放大器的出現(xiàn)和微型計(jì)算機(jī)在分光光度計(jì)中的應(yīng)用,簡(jiǎn)化了獲得導(dǎo)數(shù)光譜的方法,有力地推動(dòng)了導(dǎo)數(shù)光譜的理論和應(yīng)用研究的發(fā)展,在分光光度分析中引入導(dǎo)數(shù)技術(shù),擴(kuò)展了分光光度法的應(yīng)用范圍,在多組分同時(shí)測(cè)定,渾濁樣品分析,消除背景干擾和加強(qiáng)光譜的精細(xì)結(jié)構(gòu)以及復(fù)雜光譜的辨析等方面,導(dǎo)數(shù)分光光度法在一定程度上解決了普通分光光度法難以解決的問(wèn)題,吸光度比值導(dǎo)數(shù)分光光度法是在導(dǎo)數(shù)分光光度法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的分光光度技術(shù)?由F.Salinas等人于 1990 年提出,最先是用于解決水楊酸和水楊酸甘氨酸混合物的。?定量分析,吸收度比值導(dǎo)數(shù)分光光度法很方便的將重疊吸收帶分開(kāi)而消除干擾。與普通導(dǎo)數(shù)光譜法比較,具有分辨率更高?更靈敏?計(jì)算簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn),具有一定的發(fā)展前景。

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  • 氣相色譜法和液相色譜法的區(qū)別

    氣相色譜法和液相色譜法兼具分離和分析功能,均可以在線檢測(cè)主要差別: (1)操作條件差別 (2)進(jìn)樣方式差別 (3)檢測(cè)器差別 (4)流動(dòng)相差別 (5)分析對(duì)象差別詳細(xì):1、操作條件差別 GC:加溫操作 HPLC:通常室溫操作,高壓泵操作 2、進(jìn)樣方式差別 GC:樣品需加熱氣化或裂解 HPLC:樣品制成溶液即可 ...

  • 原子吸收光譜最佳實(shí)驗(yàn)條件是什么?

    原子吸收光譜分析中影響測(cè)量條件的可變因素多,在測(cè)量同種樣品的各種測(cè)量條件不同時(shí),對(duì)測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和靈敏度影響很大。選擇最適的工作條件,能有效地消除干擾因素,可得到最好的測(cè)量結(jié)果和靈敏度。 最佳實(shí)驗(yàn)條件選擇 1.原子吸收光譜儀吸收波長(zhǎng)(分析線)的選擇通常選用共振吸收線為分析線,測(cè)量高含量元素時(shí),可選用靈敏度較低的非共振線為分析線。如測(cè)Zn時(shí)常選用最靈敏的213.9nm波長(zhǎng),但當(dāng)Zn的含量高時(shí),為保...

  • 氣相色譜日常該怎么維護(hù)?

    1、定期更換進(jìn)樣口隔墊氣相色譜進(jìn)樣口隔墊漏氣是氣相色譜的常見(jiàn)故障之一。有些儀器有自檢功能可以發(fā)現(xiàn)漏氣,但是有些微小的漏氣問(wèn)題也是不能保證發(fā)現(xiàn)的,更有些儀器就沒(méi)有自檢功能,漏氣就更是無(wú)從查起了。曾經(jīng)就有GC-MS的初學(xué)者一夜之間漏完了一瓶氦氣,而且質(zhì)譜圖上有一些含硅的離子峰。檢查各個(gè)管路、連接閥均未發(fā)現(xiàn)問(wèn)題,最后才發(fā)現(xiàn)是進(jìn)樣口隔墊使用太久,中間竟然已經(jīng)出現(xiàn)了透光孔,氦氣就是從這里漏光的。此外,隔墊老...

  • 裂解氣相色譜是個(gè)啥?

    裂解氣相色譜可能是多數(shù)氣相色譜使用者都沒(méi)聽(tīng)過(guò),今天我們就來(lái)打破傳說(shuō),看看它的廬山真面目 Py-GC是裂解和 GC 技術(shù)的有機(jī)結(jié)合,故具有二者的優(yōu)點(diǎn):1.分析靈敏度高,樣品用量少采用 GC 的檢側(cè)器可獲得很高的分析靈敏度,樣品用量一般為微克至毫克量級(jí),若用液體樣品,進(jìn)樣量可達(dá)0.1-1μl。這對(duì)樣品量很少的分析(如司法檢驗(yàn))是極為有利的。 2.分高效率高,定量精度高因?yàn)椴捎昧?GC 分離,特別是用毛...

  • 氣相色譜儀關(guān)于人體安全與環(huán)境保護(hù)

    在維修氣相色譜儀儀器的過(guò)程中,首先一定要注意安全和注意保護(hù)環(huán)境。氣相色譜儀維修中可能造成安全事故與環(huán)境污染的因素大致如下所述: A.氫氣泄漏造成爆炸、燃燒等安全事故。 B.電子捕獲放射源造成人體傷害、環(huán)境污染事故。 C.易燃易爆、有毒、腐蝕性等危險(xiǎn)性樣品造成安全事故、人體傷害、環(huán)境污染事故。 D.高電壓、大電流造成觸電事故。 E.高溫造成的燙傷事故。 F.其他說(shuō)明書(shū)上已有描述的相關(guān)注意事項(xiàng)。 上述...

  • 色譜行業(yè)銷(xiāo)售:如何讓客戶不掛你電話?

    做銷(xiāo)售的應(yīng)該都經(jīng)歷過(guò)給客戶打電話,但是往往你剛剛開(kāi)口說(shuō)話,對(duì)方就掛了電話,這是什么原因呢?怎樣才能讓客戶不掛你電話呢? 需要注意的是: 在電話剛接通開(kāi)始的10秒鐘和你說(shuō)的前三句話,決定了客戶是否掛你電話。 首先,想想你之前掛的一些營(yíng)銷(xiāo)電話,他們有什么共同特征? 一聽(tīng)就知道是推銷(xiāo)的(推銷(xiāo)口吻太重,開(kāi)口就問(wèn)對(duì)方買(mǎi)不買(mǎi)) 說(shuō)了一大堆不知道說(shuō)的什么 自己說(shuō)自己的,不管客戶在干嘛 所以第一步我們要避開(kāi)這種情...

  • 關(guān)于氣相色譜儀器的保護(hù)

    在維修氣相色譜儀器的過(guò)程中,要注意按規(guī)范認(rèn)真仔細(xì)地操作,避免損壞氣相色譜儀器,造成新的故障或?qū)⒐收蠑U(kuò)大。應(yīng)該注意的內(nèi)容如下所述: 1.已安裝色譜柱的儀器,在通電之前應(yīng)先通入載氣,一般來(lái)說(shuō),載氣對(duì)保護(hù)儀器是有利的。 2.熱導(dǎo)檢測(cè)器必須先通載氣,然后才能加電流,否則可能燒斷鎢絲。熱導(dǎo)檢測(cè)器還必須防止氧氣、空氣進(jìn)入,否則可能造成鎢絲氧化。 3.電子捕獲檢測(cè)器必須防止氧氣、空氣、雜質(zhì)進(jìn)入,否則極易污染。 ...

  • 如何確定色譜柱老化是否完全?

    溫馨提示:拿到氣相色譜柱,在進(jìn)行檢測(cè)之前,必須要進(jìn)行老化!FID檢測(cè)器最適合用于檢測(cè)色譜柱老化時(shí)的基線。在升溫程序的末端,基線將升高,然后基線下降逐漸平穩(wěn),此時(shí)可以認(rèn)為色譜柱老化完成?!?當(dāng)色譜柱處于高溫時(shí),柱壽命急劇下降。如果色譜柱老化時(shí)超過(guò)2小時(shí)還有大量柱流失,則將色譜柱冷卻至室溫,辨認(rèn)柱流失來(lái)源如:氧氣滲入、隔墊漏氣和儀器本身的殘留物。 柱流失:在色譜柱老化之后做柱流失實(shí)驗(yàn),不進(jìn)樣跑一次程序...

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